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[交流]
HS-PEG-COOH和HS-PEG修飾納米金連接抗體一直交聯(lián)不上，請大家指導一下！
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參照Shuming Nie發(fā)表在Nature Biotechnology上的文章“In Vivo tumor targeting and spectroscopic detection with surface-enhanced Raman nanoparticle tags “，用HS-PEG-COOH和HS-PEG修飾納米金連接抗體，具體方法是： 向2.2 mL, 40 nm Au NPs中加入191 μL, 1 μM HS-PEG-COOH，室溫攪拌15 min，再加入711 μL，10 μM HS-PEG，室溫繼續(xù)攪拌3 h。反應完成后，7000 rpm離心三次，重新分散到10 mM, pH 7.2 PBS中。向其中加入5 μL, 10 mM EDC和5 μL, 10 mM NHS,室溫攪拌15 min, 離心除去剩余的EDC和NHS，重新分散至上述PBS中。加入2 μL, 1 mg/mL的抗體，繼續(xù)室溫反應2 h。然后置于4 ℃過夜，離心除去未反應的抗體，保存在10 mM, pH 7.4, PBS中備用。 注：1. 使用的HS-PEG-COOH，HS-PEG，EDC和NHS均用超純水溶解 2. HS-PEG-COOH的分子量約為3500，HS-PEG的分子量約為2000。我注意到參考文獻中使用的HS-PEG-COOH分子量小于HS-PEG的，不知道這會不會有影響？ |
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 金納米棒及修飾 | 羧基活化EDC,NHS |
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