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賢愚Libra

銀蟲 (正式寫手)

[求助] 某種生物特有的基因叫什么? 已有2人參與

只有該種生物有的一段核酸序列叫什么?我要接側(cè)環(huán)境中某種細(xì)菌的存在,要直接從環(huán)境樣品中提取,所以,能代表該細(xì)菌的核酸片段叫什么?
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煙大考研黨

金蟲 (正式寫手)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金幣+3, 贈人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-02-24 12:11:54
應(yīng)該叫做靶核酸分子 。
 1. DNA的堿基組成(G+C mol%)
  DNA堿基因組成是各種生物一個穩(wěn)定的特征,即使個別基因突變,堿基組成也不會發(fā)生明顯變化。分類學(xué)上,用G+C占全部堿基的克分子百分?jǐn)?shù)(G+Cmol%) 來表示各類生物的DNA堿基因組成特征。
  1)每個生物種都有特定的GC%范圍,因此后者可以作為分類鑒定的指標(biāo)。細(xì)菌的GC%范圍為25--75%,變化范圍最大,因此更適合于細(xì)菌的分類鑒定。
  2)GC%測定主要用于對表型特征難區(qū)分的細(xì)菌作出鑒定,并可檢驗表型特征分類的合理性,從分子水平上判斷物種的親緣關(guān)系。
  3)使用原則:G+C含量的比較主要用于分類鑒定中的否定;每一種生物都有一定的堿基組成,親緣關(guān)系近的生物,它們應(yīng)該具有相似的G+C含量,若不同生物之間G+C含量差別大表明它們關(guān)系遠(yuǎn)。但具有相似G+C含量的生物并不一定表明它們之間具有近的親緣關(guān)系。
  在疑難菌株鑒定、新種命名、建立一個新的分類單位時,G+C含量是一項重要的,必不可少的鑒定指標(biāo)。其分類學(xué)意義主要是作為建立新分類單元的一項基本特征和把那些G+C含量差別大的種類排除出某一分類單元。G+C含量的比較主要用于分類鑒定中的否定。
  2.核酸的分子雜交法(Hybridization of nucleic acids)
  生物的遺傳信息以堿基排列順序(遺傳密碼)形成線性地排列在DNA分子中,不同生物DNA堿基排列順序的異同直接反映這些生物之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近,堿基排列順序差異越小,它們之間的親緣關(guān)系就越近,反之亦然。由于目前尚難以普遍地直接分析比較DNA的堿基排列順序,所以,分類學(xué)上目前主要采用較為間接的比較方法--核酸分子雜交(hybridization),來比較不同微生物DNA堿基排列順序的相似性進(jìn)行微生物的分類。核酸分子雜交在微生物分類鑒定中的應(yīng)用包括:DNA-DNA雜交、DNA-rRNA雜交以及根據(jù)核酸雜交特異性原理制備核酸探針。
   (1)DNA-DNA雜交
   DNA-DAN雜交的基本原理:對雙鏈結(jié)構(gòu)的DNA分子進(jìn)行加熱處理時,互補結(jié)合的雙鏈可以離解成單鏈,即DNA變性;若將變性了的DNA分子進(jìn)行冷卻處理時,已離解的單鏈又可以重新結(jié)合成原來的雙鏈DNA分子,這一過程叫DNA的復(fù)性。不僅同一菌株的DNA單鏈可以復(fù)性結(jié)合成雙鏈,自不同菌株的DNA單鏈,只要二者具有同源互補的堿基序列,它們也會在同源序列之間互補結(jié)合形成雙鏈,這就稱之為DNA-DNA分子雜交。
   自60年代將DNA-DAN雜交技術(shù)應(yīng)用于細(xì)菌分類以來,已經(jīng)對大量的微生物菌株進(jìn)行過研究, 它對于許多有爭議的種的界定和建立新種起了重要作用。許多資料表明:DNA-DNA雜交同源性在60%以上的菌株可以認(rèn)為是同一個種;同源性超過70%為同一亞種;同源性在20~60%是同屬不同種的關(guān)系。
(2)DNA-rRNA雜交
   研究表明:當(dāng)兩個菌株DNA的非配對堿基超過10~20%時,DNA-DNA雜交往往不能形成雙鏈, 因而限制了DNA-DNA雜交主要應(yīng)用于種水平上的分類。為了進(jìn)一步比較親緣關(guān)系更遠(yuǎn)的菌株之間的關(guān)系,需要用rRNA與DNA進(jìn)行雜交。正如前面介紹過的,rRNA是DNA轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物,在生物進(jìn)化過程中,其堿基序列的變化比基因組要慢得多,保守得多,它甚至保留了古老祖先的一些堿基序列。因此,當(dāng)兩個菌株的DNA-DNA雜交率很低或不能雜交時,用DNA-rRNA雜交仍可能出現(xiàn)較高的雜交率,因而可以用來進(jìn)一步比較關(guān)系更遠(yuǎn)的菌株之間的關(guān)系,進(jìn)行屬和屬以上等級分類單元的分類。DNA-DNA雜交和DNA-rRNA雜交的原理和方法基本相同,只是在技術(shù)細(xì)節(jié)上有些差異,如DNA-rRNA雜交中,用同位素標(biāo)記的是rRNA而不是DNA等等。
   (3)核酸探針
   通過核酸雜交來檢測特定核苷酸序列的核酸探針技術(shù),是近10多年才發(fā)展起來的,現(xiàn)在已越來越廣泛地用于微生物鑒定、傳染病診斷、流行病調(diào)查、食品衛(wèi)生微生物檢測以及分子生物學(xué)許多領(lǐng)域(為克隆的篩選、基因表達(dá)檢測等)。所謂核酸探針(probe)是指能識別特異核苷酸序列的、帶標(biāo)記的一段單鏈DNA或RNA分子。換句話說,它是能與被檢測的特定核苷酸序列(靶序列)互補結(jié)合,而不與其他序列結(jié)合的帶標(biāo)記的單鏈核苷酸片斷。因此,一種核苷酸片斷能否作為探針用于微生物鑒定,最根本的條件是它的特異性,即它能與所檢測的微生物的核酸雜交而不能與其他微生物的核酸雜交。因此,根據(jù)特異性的不同,在微生物鑒定與檢測中的作用也不同,有的探針只用于某一菌型的檢測,有的可能用于某一種、屬、科甚至更大類 群范圍的微生物的檢測或鑒定。例如,從一株淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)隱蔽性質(zhì)粒制備的DNA探針,它具有種的特異性,可用來檢測和鑒定這種引起人類性行為傳播疾病的細(xì)菌。

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2樓2014-02-24 00:02:49
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Hliotrope

木蟲 (著名寫手)

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16S DNA吧,細(xì)菌最保守的序列,菌種鑒定都用這段序列。
Someone
3樓2014-02-24 09:16:54
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賢愚Libra

銀蟲 (正式寫手)

引用回帖:
3樓: Originally posted by Hliotrope at 2014-02-24 09:16:54
16S DNA吧,細(xì)菌最保守的序列,菌種鑒定都用這段序列。

那如果我只定量檢測環(huán)境中某一種細(xì)菌的含量,該怎么篩選出只有這中細(xì)菌 具有的保守序列呢?如果體16s的話,用什么引物?
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4樓2014-02-25 10:35:56
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賢愚Libra

銀蟲 (正式寫手)

送紅花一朵
引用回帖:
2樓: Originally posted by 煙大考研黨 at 2014-02-24 00:02:49
應(yīng)該叫做靶核酸分子 。
 1. DNA的堿基組成(G+C mol%)
  DNA堿基因組成是各種生物一個穩(wěn)定的特征,即使個別基因突變,堿基組成也不會發(fā)生明顯變化。分類學(xué)上,用G+C占全部堿基的克分子百分?jǐn)?shù)(G+Cmol%) 來表示各 ...

嗯。
那像我這樣要定量檢測環(huán)境中某一種細(xì)菌的含量,我該如何找到其靶核苷酸序列呢?或者你有相關(guān)材料推薦一下吧,謝啦。
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5樓2014-02-25 10:37:56
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