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呆望雨木蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
液相測(cè)定氨基葡萄糖-異硫氰酸苯酯衍生法樣品出現(xiàn)問(wèn)題 已有1人參與
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我參考《反相高效液相色譜法測(cè)定氨基葡萄糖硫酸鹽》_黃鑫這篇文獻(xiàn)，使用異硫氰酸苯酯在弱堿性條件下與氨基葡萄糖反應(yīng)，測(cè)氨基葡萄糖的含量，具體步驟是這樣的： 1.氨基葡萄糖水溶液1mL+1mL緩沖鹽+0.5%異硫氰酸苯酯甲醇溶液，渦旋混合（加入異硫氰酸苯酯后試管里面的溶液變成白色渾濁的狀態(tài)） 2.80℃反應(yīng)20min，（取出時(shí)澄清，試管底部有油珠狀的不明“液體”），用冷水冷卻，（冷卻后試管里面的溶液又變成白色渾濁狀態(tài)，試管底部有油珠狀的不明“液體”） 3.加入1mL正己烷，渦旋，萃取，（此時(shí)下層溶液較澄清，上層正己烷有少許渾濁）（文獻(xiàn)上說(shuō)是由于P ITC的水解產(chǎn)物可能干擾測(cè)定結(jié)果,而且對(duì)色譜柱的污染也比較嚴(yán)重，故用正己烷萃取） 4.取下層溶液0.22μ濾頭過(guò)濾入樣品瓶，此時(shí)是澄清狀態(tài)， 問(wèn)題來(lái)了，我準(zhǔn)備好樣品已經(jīng)是下午6點(diǎn)，然后就去進(jìn)樣了，第二天發(fā)現(xiàn)樣品瓶里面出現(xiàn)像是片狀的結(jié)晶，空白樣品瓶里面也是有少量結(jié)晶，樣品里面會(huì)比較多，我想著個(gè)析晶會(huì)是什么引起的呢？是異硫氰酸苯酯的水解產(chǎn)物嗎？怎么解決這個(gè)問(wèn)題呢？ |
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呆望雨
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