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florachenyi新蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)染的問題 已有1人參與
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請(qǐng)問各位老師或師兄師姐，我想研究某一個(gè)蛋白A在腫瘤干細(xì)胞自我更新、分化中的作用，希望通過載體構(gòu)建和RNA干擾的方式建立高、低表達(dá)A蛋白的腫瘤干細(xì)胞系。 那么，如果該腫瘤干細(xì)胞有分選標(biāo)記（如CD133），我可以利用CD133流式分選后進(jìn)行轉(zhuǎn)染么？ 如果該腫瘤干細(xì)胞沒有分選標(biāo)記，但是目前有其他方法可以富集（如干細(xì)胞球）腫瘤干細(xì)胞，可以進(jìn)行轉(zhuǎn)染么?求回復(fù)！ |
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treetreew
木蟲 (小有名氣)
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2樓2014-02-28 16:28:29
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不推薦轉(zhuǎn)染，病毒吧 分腫瘤干，先找maker，定抗體的克隆號(hào)（很重要，否則和報(bào)道的圖不一致），最好用磁珠先粗分，然后流式細(xì)分。 沒標(biāo)記，就養(yǎng)腫瘤干細(xì)胞球 腫瘤干我·也計(jì)劃養(yǎng)，看了看好像還是培養(yǎng)腫瘤球好些，但也有文獻(xiàn)說腫瘤球中的細(xì)胞不見得一定是腫瘤干。 此外untouch之類的低吸附板子以及因子應(yīng)該不便宜 正因?yàn)椴缓米�，為了靠譜些，還是病毒吧，shRNA以及過表達(dá)也不要構(gòu)建了，摸條件會(huì)累死的，累死還好，就怕累死了也沒結(jié)果，建議買吧，我們當(dāng)時(shí)過和敲都市買的，事半功倍，祝順利！ |
3樓2014-03-01 00:37:38
florachenyi
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4樓2014-03-02 16:32:04
5樓2014-03-03 17:00:51
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