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我聽(tīng)五月天木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
現(xiàn)在細(xì)胞存活率測(cè)試用什么是主流？ 已有2人參與
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1、MTT?XTT?MTS?WST-1?CCK-8?哪個(gè)是高校研究實(shí)驗(yàn)的主流？各位前輩目前正在用什么？ 2、我實(shí)驗(yàn)室一直是MTT,有的用SRB（這個(gè)我沒(méi)在文獻(xiàn)里讀到過(guò)，所以不想用）。前段時(shí)間看到有人說(shuō)MTS很便宜？是跟CCK-8比較才便宜嗎？ 3、我從promega查到好幾種 CellTiter 96® AQueous MTS Reagent Powder--------------------------------1g G1111 6605元 CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay--5,000assays G3581 4999元這是包含MTS/PMS的試劑盒嗎？是5000孔4999元？ CellTiter 96® AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay--5,000assays G5430 6429元 怎么我覺(jué)得比MTT貴的多啊？？？而CCK-8粉末是一克5,585.00元~這不是比CCK-8都貴？怎么回事兒？ 4、希望用過(guò)MTS的前輩不吝指教！�。。。�！說(shuō)一下買(mǎi)MTS做體外毒性測(cè)試的話，每塊96孔板用MTS/PMS的成本要多少錢(qián)？自己買(mǎi)粉末現(xiàn)配好？還是買(mǎi)promega的試劑盒好？自己買(mǎi)粉末MTS、PMS各買(mǎi)多少？ 5、Phenazine methosulfate (PMS)溶液就是--0.92mg/ml PMS in DPBS？ |
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 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作 |
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mTT、 CCK8、XTT一類(lèi)的，原理差不多的，只是試劑改進(jìn)了點(diǎn)而已。我個(gè)人覺(jué)得這個(gè)不太準(zhǔn)，容易出問(wèn)題的地方很多。 譬如，細(xì)胞狀態(tài)、鋪板子勻不勻、槍準(zhǔn)不準(zhǔn)、沒(méi)孔吸得干不干凈。。。。所以覺(jué)得這個(gè)不是很準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)起來(lái)會(huì)很不漂亮 這個(gè)主流的問(wèn)題，還真不清楚 至于多個(gè)實(shí)驗(yàn) 例如關(guān)于細(xì)胞減少吧， 可以做1、MTT或CCk8 比比那個(gè)吸光度 2、增殖曲線 3、流式檢測(cè)看增殖 ，記幾個(gè)孔的細(xì)胞數(shù)。或細(xì)胞數(shù)變化不大，染個(gè)DAPI看看活的多嗎？ 4、再可以做個(gè)組化類(lèi)的染色，看看凋亡什么的 5、拍拍照片，顯示細(xì)胞數(shù)細(xì)胞狀態(tài)，等等就是能辦到的，相關(guān)的，盡量都做了。 現(xiàn)在很多實(shí)驗(yàn)不光要證明正向走是對(duì)的， 還要通過(guò)反向推也是對(duì)的，那才ok 要不只一個(gè)mtt或cck8的實(shí)驗(yàn)，重復(fù)次數(shù)不多的話，我認(rèn)為，那就是在玩鬧。 |
我聽(tīng)五月天8樓2014-03-04 22:41:54
浩子jerry
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2樓2014-02-28 23:04:48
我聽(tīng)五月天
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3樓2014-03-01 08:49:15
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4樓2014-03-01 09:32:59
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