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纖維素崩解實(shí)驗(yàn)濾紙不潰爛？ 已有3人參與
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| 我也做了濾紙潰爛實(shí)驗(yàn)的那些菌長(zhǎng)了，而且菌液很濃但是濾紙還是完好，有的菌是附著在濾紙上的，我用的培養(yǎng)基是蛋白胨5g/L，濾紙，水，pH7.0左右，考慮是不是我再用胨水做個(gè)空白，看接進(jìn)去后該菌是否生長(zhǎng)？還有我是不會(huì)是可以在立體顯微鏡下看空白和較濃菌液中的濾紙有無(wú)變化，還有在搖床上空白對(duì)照中有纖維素絲，但菌液已看不出有纖維絲了，能否說(shuō)明能夠利用濾紙了呢？蛋白胨成分不明確的話，我用尿素代替蛋白胨可以嗎？有哪位大神不吝賜教？ |
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葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液：葡萄糖在108℃烘箱內(nèi)烘干30min~1h后，配置1.037g/ml濃度葡萄糖溶液，再分別取0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml葡萄糖溶液用蒸餾水稀釋至2ml，加入3mlDNS試劑沸水浴10min,立即用冷水終止反應(yīng)，另用0ml，在波長(zhǎng)為540nm下測(cè)定光吸收值(OD值)，光吸收值作為縱坐標(biāo)，以葡萄糖含量作為橫坐標(biāo)，繪制出葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線及曲線方程式[71]。 酶活力按國(guó)際單位的定義是：每min催化水解生成1μmol葡萄糖的酶量為一個(gè)酶活力單位IU。 2.2.2.2 濾紙酶活的測(cè)定 DNS法： 取1ml菌液在6000r的離心機(jī)中離心10min，棄去沉淀，加入濾紙底物溶液。 在50℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)1h。反應(yīng)后加入3mlDNS溶液，放于沸水浴中煮沸10min，用冷水立即終止反應(yīng)。在波長(zhǎng)為540nm下測(cè)定光吸收值(OD值)。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算濾紙酶的活性。對(duì)照為菌液沸水10min，立即冷水冷卻。每個(gè)樣做三個(gè)平行[28]。 CMC酶活的測(cè)定 DNS法： 取1ml菌液在6000r的離心機(jī)中離心10min，棄去沉淀，加入CMC底物溶液。 在50℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)30min。反應(yīng)后加入3mlDNS溶液，放于沸水浴中煮沸10min，用冷水立即終止反應(yīng)。在波長(zhǎng)為540nm下測(cè)定光吸收值(OD值)。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算濾紙酶的活性。對(duì)照為菌液沸水10min，立即冷水冷卻。每個(gè)樣做三個(gè)平行。 微精纖維素酶活的測(cè)定 取1ml菌液在6000r的離心機(jī)中離心10min，棄去沉淀，加入微精纖維素底物溶液。 在50℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)2h。反應(yīng)后加入3mlDNS溶液，放于沸水浴中煮沸10min，用冷水立即終止反應(yīng)。在波長(zhǎng)為540nm下測(cè)定光吸收值(OD值)。根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)算濾紙酶的活性。對(duì)照為菌液沸水10min，立即冷水冷卻。每個(gè)樣做三個(gè)平行。 |
7樓2014-03-05 15:51:35
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