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rose.no.9木蟲 (著名寫手)
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[求助]
購買的厭氧菌活化失敗，為什么，還有希望嗎 已有1人參與
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| 在CGMCC和CICC購買的厭氧菌種，按照購買時候的說明操作，可是都已經(jīng)三四天了，還是沒有長出菌落來。有沒有做過的同學，提示一下我該怎么辦？賣家說可能需要重新購買，好幾千塊錢呢。。。。謝謝��！ |
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2樓2014-03-12 00:50:27
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3樓2014-03-12 08:13:34
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購買的封在安瓿瓶中的凍干粉。操作如下：1.開封。在超凈臺中，酒精消毒，灼燒，滴無菌水，鑷子敲碎。2.懸浮。用移液槍吸取400微升液體培養(yǎng)基（配方是購買菌種時附的）加入安瓿中，混勻。3.用一次無菌性注射器吸取200微升菌懸液，加入?yún)捬豕苤校▋?nèi)有斜面培養(yǎng)基，厭氧管是抽真空后充入氮氣）。4.放入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中培養(yǎng)，37℃。7號下午接種的，現(xiàn)在觀察來看，有點絮狀的東西在斜面邊緣，加入的液體培養(yǎng)基也還是呈液體狀。但是在斜面上沒有看到菌落長出來，是不是我加入的菌懸液過多了？還是我原本應(yīng)該用液體搖床進行活化？反正現(xiàn)在感覺是死灰一片。。。。。失望，不知道該怎么辦。 |
4樓2014-03-12 20:16:30
ctt1984
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rose.no.9(dllchina代發(fā)): 金幣+5, 謝謝熱心應(yīng)助 2014-03-13 10:42:44
dllchina: 回帖置頂 2014-03-13 10:42:52
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一般來講，商家賣給你的都是活化后分裝給你的，理論上不會出錯。我估計是你菌液涂多了，都長在一起形成菌膜了。要知道一管里面幾億個細菌，你還希望在那么小的斜面上長出單菌落，不太現(xiàn)實。建議你這么去做： 1，安培瓶中還有的話，取10ul的樣子做10倍倍比稀釋，分別涂平板，之后置于厭氧，37度培養(yǎng)，快的話24小時，慢的話也就48小時能長成單菌落。 2，安培瓶中沒有的話，從你的厭氧管中用接種環(huán)輕輕挑一點，劃線后置于厭氧，37度培養(yǎng)，待單菌落長出來后再純培養(yǎng) |
5樓2014-03-13 08:28:55
rose.no.9
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6樓2014-03-13 20:08:13
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