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蒲公英77木蟲 (小有名氣)
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關(guān)于生物正交的實(shí)驗(yàn),熒光染料會(huì)不會(huì)直接進(jìn)入細(xì)胞
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最近看到一篇生物正交的文獻(xiàn),用疊氮化的糖孵育細(xì)胞,細(xì)胞膜表面的糖蛋白就用標(biāo)記上疊氮,再用炔基修飾的熒光染料與之反應(yīng),就會(huì)對(duì)相應(yīng)的糖蛋白進(jìn)行標(biāo)記。 有一個(gè)問題不明白:這些熒光染料大多數(shù)本身也會(huì)進(jìn)入細(xì)胞,那么細(xì)胞內(nèi)應(yīng)該會(huì)有一些背景熒光啊,可是文獻(xiàn)中的熒光分子只標(biāo)記在膜上,他們是怎么把未參與反應(yīng)的熒光分子去除的?難道用PBS洗細(xì)胞的時(shí)候會(huì)把多余的染料洗掉?求高手解答啊 附上文獻(xiàn)A Cis-Membrane FRET-Based Method for Protein-Speci fic Imaging of Cell-Surface Glycans |
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