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ChIP實(shí)驗(yàn)DNA超聲破碎打不斷怎么回事? 已有4人參與
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| 如標(biāo)題啊,我是做藍(lán)藻的,找DNA-蛋白結(jié)合位點(diǎn),可是DNA破碎一步就是做不出來,我是把100ml的菌液(OD730=0.6)回收做細(xì)胞破碎,離心上清用實(shí)驗(yàn)室的儀器做超聲,可就是沒反應(yīng),超與不超是一樣的條帶,但是把DNA純化出來就能超碎,有沒有誰知道是為什么呢,是不是我哪一步做錯(cuò)了,一個(gè)月了,我是新手,有相關(guān)經(jīng)驗(yàn)的幫忙指點(diǎn)一下。 |
新蟲 (初入文壇)
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我的程序是10 s,30 s ice,20%功率,型號(hào)是東芝JY99-IIDN,其實(shí)這個(gè)是標(biāo)配大探頭的,我們實(shí)驗(yàn)室只有這個(gè)儀器,安了個(gè)2mm的小探頭,是不是儀器的問題,還總是不工作,主機(jī)響,能量傳不到探頭,一換水就好了,我的樣品就不行,我們這個(gè)破菌的效果都不怎么好,但是把DNA基因組純化出來超聲,效果還是挺好的。藍(lán)藻做7942時(shí)也能都打碎,到6803時(shí)就不行了,6803膜特別多,幾乎是融不完的。 |
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