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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 酶切的目的
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JGZYDX新蟲 (小有名氣)
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[求助]
酶切的目的 已有2人參與
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| 其實沒有特別的針對哪個實驗，只是在許多實驗中都見過酶切，包括自己做過的T-RFLP也用了酶切，有的網(wǎng)友連接轉(zhuǎn)化了送去測序也用酶切，但其實我不大理解為什么進行酶切，所以，懇請大家說一下，大概什么狀況下需要進行酶切？？？謝謝 |
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gyesang: 回帖置頂 2014-04-02 18:44:34
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酶切的作用： 1. 初步確定質(zhì)粒是否正確，通過在質(zhì)粒上尋找不同的酶切位點，酶切電泳，看是否和預期一致。（構建載體的過程中，送測序前做酶切也是為了初步驗證是否構建成功） 2. 構建載體的時候需酶切載體，如果用連接的方法的話目的片段也需要酶切才能裝進載體中。 3. 使環(huán)狀質(zhì)粒線性化，用于轉(zhuǎn)化。這個在酵母的基因重組經(jīng)常碰到，向酵母中轉(zhuǎn)入線性片段使其整合到酵母基因組中。BAC修改中也如此。 |
3樓2014-04-02 17:32:51
夏天的普洱茶
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2樓2014-04-02 17:13:45
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