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[求助]
hepg2細(xì)胞遇到了大麻煩，求幫助！ 已有8人參與
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3月18日買的hepg2細(xì)胞，以前沒有養(yǎng)過，養(yǎng)了一段時(shí)間，開始兩天還好，但越來細(xì)胞表現(xiàn)出死亡的跡象：不增殖，細(xì)胞內(nèi)有很多小的圓圓的亮泡，開始不知道這些細(xì)胞內(nèi)的亮泡是怎么回事，后來查好像說是細(xì)胞老化或培養(yǎng)基有問題，培養(yǎng)基：高糖DMEM+10%~12%FBS+1%雙抗，培養(yǎng)基鑒定沒有污染�？墒沁@是肝癌細(xì)胞系呀，怎么會老化呢，癌細(xì)胞不是有無限的增殖能力嗎，現(xiàn)在細(xì)胞快死了，求高手指點(diǎn)，最好是養(yǎng)過這個(gè)細(xì)胞的高手指點(diǎn)。附圖幾張：第一張，細(xì)胞剛運(yùn)輸來時(shí)的照片，其余的是從瓶里傳出來及培養(yǎng)幾天的圖片。謝謝各位了，急呀！圖片上紅色圈的是圓圓的亮泡。 剛買來.JPG _3197857.JPG _3228021.JPG _3197854.JPG |
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c_jade
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2樓2014-04-04 15:35:47
3樓2014-04-07 20:32:49
blckly
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【答案】應(yīng)助回帖
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小雷想: 金幣+20, ★有幫助, 空泡狀態(tài)是不是有問題？我向賣細(xì)胞的反映說有空泡，他們說什么空泡是正常的，他們的細(xì)胞是經(jīng)過國際認(rèn)證的。 2014-04-17 20:05:59
小雷想: 金幣+20, ★有幫助, 空泡狀態(tài)是不是有問題？我向賣細(xì)胞的反映說有空泡，他們說什么空泡是正常的，他們的細(xì)胞是經(jīng)過國際認(rèn)證的。 2014-04-17 20:05:59
| 這個(gè)現(xiàn)象跟我以前遇到過的有點(diǎn)像，首先換新的血清和培養(yǎng)基試試，培養(yǎng)基沒有污染不代表可以用來培養(yǎng)細(xì)胞，也有可能里面營養(yǎng)成分已經(jīng)缺失了，如果實(shí)在不行就用胎牛血清培養(yǎng)一段時(shí)間。 |
11樓2014-04-17 16:42:27
張平1118
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13樓2014-04-19 09:40:20
yu756849034
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【答案】應(yīng)助回帖
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七樓和八樓說的都挺好。你的細(xì)胞第一幅圖是多少倍鏡下拍出來的，可能是因?yàn)榕牡脑驅(qū)е逻@樣的差勁圖像。樓主說剛運(yùn)過來的時(shí)候有亮泡，那個(gè)是因?yàn)榧?xì)胞在路上顛簸之后導(dǎo)致生長狀態(tài)變?nèi)跫?xì)胞貼壁能力下降進(jìn)而細(xì)胞死亡漂浮在懸液之中。后來的圖片可以看出細(xì)胞的生長狀態(tài)已有好轉(zhuǎn)，不過還有待很大的提高。樓主可以從消化上下下功夫，你的圖中可以明顯的看到好多細(xì)胞團(tuán)聚集在一起，那個(gè)是因?yàn)橄划?dāng)引起的。主要可能是：1.消化時(shí)間過程，導(dǎo)致細(xì)胞消化過度，成片的脫落，出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)；2.消化的過程中不要經(jīng)常搖晃細(xì)胞瓶；3.細(xì)胞不要生長到太密，一般不要到八成以上。 還有樓主可以測量下你們的PBS的PH是多少，這個(gè)也是會影響細(xì)胞的生長狀態(tài)的。 這些就是我的建議啦，希望可以幫助到你。祝你好運(yùn)！��！  |
14樓2014-04-25 16:39:36
4樓2014-04-08 16:40:52
xuehu2008
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5樓2014-04-08 17:13:56
6樓2014-04-08 19:27:20
pumaatlarge
禁蟲 (初入文壇)
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7樓2014-04-08 20:17:26
地瓜大將軍
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8樓2014-04-08 20:53:44
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不好意思，沒有明白你的意思。第一張圖就是細(xì)胞剛送來時(shí)還未做任何處理的圖片，在路上已經(jīng)運(yùn)輸了幾天了。其實(shí)從第一張圖上就能看到好多明亮色的點(diǎn)，但以前養(yǎng)細(xì)胞也很少，沒有太多經(jīng)驗(yàn)，所以不明白它們是什么，也沒想到它們預(yù)示著什么不好的結(jié)果。之后我們自己動手養(yǎng)的時(shí)候細(xì)胞從來沒有長到過80%，因?yàn)樗揪筒辉鲋常竺孢@幾張圖是第一次從剛買來的瓶子里傳出來的，一瓶傳出了兩瓶，也可能是調(diào)的密度大所以長的面積還不錯(cuò)，再之后傳就再也沒有長到30%。 |
9樓2014-04-09 15:57:49
10樓2014-04-09 16:01:21
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