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暖心89銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
拓撲異構(gòu)酶作用的超螺旋DNA 已有1人參與
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| 為什么現(xiàn)在查不到超螺旋pBR322DNA的廠家了？作為拓撲異構(gòu)酶的底物進行瓊脂糖凝膠電泳的話，可以用哪種DNA代替？ |
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【答案】應助回帖
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暖心89(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2014-04-05 15:46:03
暖心89: 金幣+19, ★★★很有幫助, 謝謝 2014-04-05 19:44:13
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| promega 公司產(chǎn)品編號是D1511,479元，http://www.promega.com.cn/Produc ... amp;PostType=Detail 。不確定超螺旋的比例。用量大的話，可以咨詢一些代制備質(zhì)粒的公司看看會不會便宜一些。 |
2樓2014-04-04 18:43:13
暖心89
銅蟲 (小有名氣)
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3樓2014-04-06 19:13:00
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pBR322是一種質(zhì)粒(plasmid)，本身就是經(jīng)典的克隆載體（vector)，整個質(zhì)粒pBR322 DNA。但現(xiàn)在這個質(zhì)粒實際在分子克隆中不常使用了。如果10ug夠用，可以不做轉(zhuǎn)化大腸桿菌和質(zhì)粒提取，不夠用就提取一些。你要做DNA松弛實驗，可以考慮其他容易獲得的質(zhì)粒超螺旋DNA，可以買個試劑盒回來提取一些，保證夠用又省錢，有熟悉質(zhì)粒提取的同學帶著做提取就更好。嚴謹一點的話，找有超速離心機的實驗室做一下超螺旋質(zhì)粒DNA的分離，次一點的就用好點的試劑盒多提取幾次，爭取得一些超螺旋含量高的樣品。 |
4樓2014-04-06 23:17:53
暖心89
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。。 5樓2014-04-07 09:30:44
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夠用就直接做了。不清楚小牛胸腺DNA用于你的實驗是否合適。上海捷瑞的DNA便宜一些，http://www.generay.com.cn/cpxx/list_27.aspx?lcid=20，很多公司提供質(zhì)粒DNA制備服務，比如 http://www.genewiz.com.cn/public/plasmidprep.aspx，建議你咨詢一下本地的經(jīng)銷商，或者找找本地的研究單位提供一點。如果實驗條件具備，自己提取也是很簡單的。 |
6樓2014-04-07 15:33:14
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