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lishuangjun銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
鄰苯二酚類化合物合成與核酸交聯(lián)的生物活性
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前幾天做的實(shí)驗(yàn)。鄰苯二酚類化合物對線性DNA的交聯(lián)活性檢測 沒做過凝膠電泳。總是在擔(dān)心。果然最后結(jié)果是失敗了 不知道為嘛幾個(gè)孔里面都沒有像。 兩塊板，一塊加了gel red 一塊沒加。 孔里面的東西依次是：marker 24ul 對照：化合物0ul Tris-HCl 2ul 線性pBR322 5ul H2O 11ul 酪氨酸酶 2ul 6×loading buffer 4ul /總體系24ul 化合物一100uM：化合物1-100 2ul Tris-HCl 2ul 線性pBR322 5ul H2O 9ul 酪氨酸酶 2ul 6×loading buffer 4ul /總體系24ul 化合物一500uM：化合物1-500 2ul Tris-HCl 2ul 線性pBR322 5ul H2O 9ul 酪氨酸酶 2ul 6×loading buffer 4ul /總體系24ul 化合物二100uM：化合物2-100 2ul Tris-HCl 2ul 線性pBR322 5ul H2O 9ul 酪氨酸酶 2ul 6×loading buffer 4ul /總體系24ul 化合物二500uM：化合物2-500 2ul Tris-HCl 2ul 線性pBR322 5ul H2O 9ul 酪氨酸酶 2ul 6×loading buffer 4ul /總體系24ul 電泳時(shí)先將電泳液浸沒凝膠，然后用移液槍點(diǎn)樣至樣品孔。50V，2.5h 不知道哪里出錯(cuò)了。總感覺是點(diǎn)樣的時(shí)候，由于電泳液已經(jīng)浸沒了，樣品隨著電泳液擴(kuò)散走了。就像墨水滴到水里一樣。 然后在此，想知道實(shí)驗(yàn)的問題所在。更想知道，凝膠電泳的詳細(xì)步驟，特別是點(diǎn)樣那一步。我個(gè)人認(rèn)為，點(diǎn)樣后，樣品沒有被凝膠固定住，總感覺會跑掉一樣。 lsj-1.jpg lsj-2.jpg |
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