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金蟲(chóng) (小有名氣)

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專(zhuān)業(yè): 微生物學(xué)

[求助] ITC等溫滴定實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題----------------------------求助

求助：

   最近想做蛋白與小分子物質(zhì)之間的等溫滴定實(shí)驗(yàn)，但是，查資料發(fā)現(xiàn)，ITC所需的蛋白濃度在幾十μM到幾mM之間，但是，我純化后的目的蛋白濃度僅僅只有0.02μM左右，距離要求差了100倍左右了。想請(qǐng)問(wèn)做過(guò)ITC的或者高效表達(dá)過(guò)外源蛋白的蟲(chóng)友，你們是如何獲得這么高濃度的蛋白的。

   補(bǔ)充：我是用大腸桿菌作為表達(dá)菌種，PET系列為載體，使用Ni-His標(biāo)簽的蛋白純化試劑盒純化得到目的蛋白的，所以，這種方法獲得的蛋白是小量的，在20ml左右，所以，采用透析的方法不行。

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1樓 2014-04-16 20:55:48

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