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請(qǐng)問(wèn)做蛋白水解用OPA還是茚三酮好呢 已有1人參與
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xiaoamuchong
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
dllchina: 金幣+2, 鼓勵(lì)熱心應(yīng)助 2014-04-19 20:04:35
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應(yīng)用茚三酮方法來(lái)側(cè)定水解物的水解度是一種比較古老的方法。茚三酮和α一氨基產(chǎn)生藍(lán)色化合物。這種方法是非常靈敏的, 但是一般配制成的顯色劑的穩(wěn)定性較差(試劑對(duì)氧非常敏感) , 利用AOAC(1980版)中采用的顯色劑, 則可彌補(bǔ)這個(gè)不足, 顯色劑在冰箱中可以保存一周。氨基的相互作用和空白具有很高的值, 并且由于需要形成發(fā)色基團(tuán), 分析時(shí)加熱和冷卻都需要很長(zhǎng)時(shí)間。郭興鳳對(duì)此方法進(jìn)行了改進(jìn), 利用待水解原料的完全水解液作為標(biāo)準(zhǔn), 消除了由于不同氨基酸與茚三酮結(jié)合產(chǎn)物的呈色度不同對(duì)測(cè)定結(jié)果造成的誤差。 郭興鳳. 蛋白質(zhì)水解度的測(cè)定[J]. 中國(guó)油脂,200 ,25(6)，176 一177 . OPA方法是一個(gè)快速而簡(jiǎn)單的測(cè)定蛋白質(zhì)水解物水解度的方法, 不需要很長(zhǎng)時(shí)間的反應(yīng)。OPA測(cè)定水解度依靠水解的底物,在OPA和半朧氨酸之間發(fā)生一個(gè)弱且不穩(wěn)定的反應(yīng), 這種方法不適合用于半朧氨酸豐富的底物中, 且脯氨酸和OPA不反應(yīng)。 |
2樓2014-04-19 16:27:47
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