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alor超級(jí)版主
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[求助]
按照別人文章的方法處理血樣，結(jié)果因?yàn)殡s質(zhì)影響導(dǎo)致隨后結(jié)果基線(xiàn)不穩(wěn)，求指點(diǎn)！ 已有1人參與
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第一次發(fā)帖求助，希望各位高手不吝賜教！ 情況如下： 血樣前處理： 取50ul血漿，加200ul甲醇，渦旋15s，再加入300ul乙酸乙酯，渦旋15s。12000rpm，離心，去上清液440ul，氮吹至干。300ul流動(dòng)相復(fù)溶，進(jìn)樣20ul檢測(cè)。 HPLC色譜條件： 流動(dòng)相：乙腈-水（40-60） 流速：1ml/min 檢測(cè)波長(zhǎng)：230nm 結(jié)果： 第一針進(jìn)樣，結(jié)果很順利，保留時(shí)間9.3min，基線(xiàn)也很平，跑到第20min結(jié)束 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263508_351.jpg 5min時(shí)間點(diǎn)血樣結(jié)果 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263508_300.jpg 9.29min處的紫外 第二針進(jìn)樣，結(jié)果還好，但是在10min以后開(kāi)始出現(xiàn)起伏 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263732_206.jpg 10min時(shí)間點(diǎn)血樣結(jié)果 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263733_526.jpg 9.32min處的紫外 第五針進(jìn)樣，藥物出峰的位置已經(jīng)嚴(yán)重波動(dòng)了，紫外也變得奇異了 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263864_931.jpg 25min時(shí)間點(diǎn)血樣結(jié)果 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263865_437.jpg 紫外結(jié)果出現(xiàn)疑似雜志的情況 第六針波動(dòng)仍然存在，看起來(lái)好像情況變好了，但是看完紫外就整個(gè)人都不好了 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263865_572.jpg 30min時(shí)間點(diǎn)血樣結(jié)果 http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263865_201.jpg 紫外結(jié)果 之前有做過(guò)空白血樣，結(jié)果跟第一針類(lèi)似，只是在藥物保留時(shí)間是空白而已，但是現(xiàn)在，居然完完全全變成雜質(zhì)的峰，這該如何是好？ 第九針（120min）這已經(jīng)完全無(wú)法入眼了  這都什么亂七八糟的東西啊http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263866_463.jpg http://d.kankan3d.com/file/data/ ... _1398263864_108.jpg 情況說(shuō)明我在上周有做過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)（一只大鼠灌胃給藥），根本沒(méi)有出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。大約在3h點(diǎn)就已經(jīng)檢測(cè)不到了。 完全處于迷惘當(dāng)中，希望高人指點(diǎn)打救，感謝不盡！  1.jpg 2.jpg 3.jpg 4.jpg 10.jpg 5.jpg 6.jpg 7.jpg 8.jpg 9.jpg |
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2樓2014-04-23 22:57:43
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【答案】應(yīng)助回帖
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alor: 金幣+50, ★★★很有幫助 2014-10-14 10:14:37
alor: 金幣+50, ★★★很有幫助 2014-10-14 10:14:37
| 應(yīng)該是內(nèi)源性物質(zhì)的干擾，有一些極性很小的內(nèi)源性物質(zhì)在干擾測(cè)定，且你當(dāng)前的流動(dòng)相條件下會(huì)很晚出來(lái)，你可以考慮下使用梯度洗脫，就是時(shí)間比較長(zhǎng)，這樣的話(huà)極性小的東西也可以沖出來(lái)了 |
4樓2014-05-22 15:48:26
sekiwang
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5樓2014-05-22 17:17:49
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