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[求助]
IP后WB，蛋白比預(yù)期的大，正反拉蛋白都做了，都是大十幾kD 已有4人參與
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最近在苦一個(gè)圖，所以做了個(gè)ChIP，然后用我的目標(biāo)蛋白（蛋白A）做WB，結(jié)果發(fā)現(xiàn)雜出來(lái)的帶比蛋白A的理論大小大十幾kD。 我們懷疑可能是非特異性條帶的結(jié)合，于是嘗試用蛋白A做CO-IP，然后用ChIP的抗體做WB，發(fā)現(xiàn)雜出來(lái)的帶也比預(yù)計(jì)的大十幾kD。 現(xiàn)在懷疑可能情況有一下幾種： 1.發(fā)生了什么修飾 造成蛋白變大 2.結(jié)合了其他分子 但是由于WB是變性的 所以這一點(diǎn)上我們持有懷疑意見(jiàn) 3.非特異性結(jié)合 這一點(diǎn)上急需方法來(lái)排除，希望高手可以指教一下 我們實(shí)驗(yàn)室一直做RNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)，最近才開(kāi)始摸索Chromatin相關(guān)實(shí)驗(yàn)，小菜鳥(niǎo)滿臉血跪求指教 OTZ |
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 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) | 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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zxthhr7798
木蟲(chóng) (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2014-04-24 12:21:50
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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2樓2014-04-24 10:46:32
jurkat.1640
至尊木蟲(chóng) (文壇精英)
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3樓2014-04-24 11:08:31
5樓2014-04-24 15:49:38
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