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LIVE/DEAD BacLight 染色能對(duì)植物致病真菌孢子染色嗎？？
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LIVE/DEAD BacLight 染色對(duì)植物致病真菌孢子死活染色的原理， 鑒定活的孢子常用哪些染料，鑒定死的孢子常用哪些染料？能否有相關(guān)的文獻(xiàn) |
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uuu555000: 金幣+1 2014-09-22 16:54:47
| BACLight染色原理是利用熒光染色劑與細(xì)胞核酸結(jié)合，使核酸在藍(lán)光的激發(fā)下發(fā)射熒光，通過測(cè)定發(fā)射熒光的強(qiáng)度確定樣品中活菌水平。所用核酸染色劑為SYTO®9和Propidium iodide（PI，碘化丙啶）。SYTO®9是一種小分子染料，具有良好的細(xì)胞膜滲透性，可穿過完好的細(xì)胞膜進(jìn)入到細(xì)胞核內(nèi)與核酸結(jié)合并對(duì)其染色，在藍(lán)光激發(fā)下發(fā)射綠色熒光，可以認(rèn)為SYTO®9能夠?qū)в屑?xì)胞核的細(xì)菌進(jìn)行染色。PI分子量相對(duì)較大，不具有細(xì)胞膜滲透性，不能滲透穿過完好的細(xì)胞膜，只能進(jìn)入細(xì)胞膜已破壞的細(xì)菌細(xì)胞并與其核酸結(jié)合染色，在藍(lán)光激發(fā)下發(fā)射紅色熒光，可以認(rèn)為PI只能對(duì)死菌（細(xì)胞膜被破壞的細(xì)菌）進(jìn)行染色。由于PI比SYTO®9對(duì)核酸的親和力更強(qiáng)，所以被SYTO®9染色的死菌細(xì)胞在有PI存在的情況下會(huì)重新與PI分子結(jié)合，使核酸最終被染紅色。當(dāng)兩種染色劑共同作用下的細(xì)菌細(xì)胞，顯綠色熒光的細(xì)胞被認(rèn)為是具完整細(xì)胞膜的活菌，而顯紅色熒光的細(xì)胞被認(rèn)為是細(xì)胞膜有破損的死菌。通過這種染色方法，可以簡(jiǎn)便清晰地分析出活菌在菌液中的比例。 |
2樓2014-04-25 13:04:21
mizhoulong
木蟲 (著名寫手)
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3樓2014-04-29 11:10:45
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