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cy211木蟲 (職業(yè)作家)
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[求助]
小弟剛買回來100克葡聚糖G-15填料，不知道如何處理，沒有說明書-求指導(dǎo)！ 已有2人參與
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| 小弟剛買回來100克葡聚糖G-15填料，不知道如何處理，沒有說明書----求指導(dǎo)的大神幫幫忙吧！有誰(shuí)用過的，或者有說明書的給小弟一份吧，我就是不知道，怎么處理，一直到裝柱子，具體怎么操作，有誰(shuí)用過的給指點(diǎn)一下吧！�。。。。≈x謝大家了�。。。� |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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以下供參考： 凝膠過濾填料的分離范圍表 SephadexG-10葡聚糖凝膠 G-10 分離范圍<700 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-15 葡聚糖凝膠 G-15 分離范圍<1500 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-15 葡聚糖凝膠 G-15 分離范圍<1500 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sepharose 6B 瓊脂糖凝膠 6B 分離范圍：1000-5000，適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 ConA-Sepharose ConA瓊脂糖凝膠 分離范圍：1000-5000，適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝膠 G-25 中 分離范圍 1000-5000 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-25 Medium 葡聚糖凝膠 G-25 中 分離范圍 1000-5000 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-25 Fine 葡聚糖凝膠 G-25 細(xì) 分離范圍 1000-5000 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 Sephadex G-25 Fine 葡聚糖凝膠 G-25 細(xì) 分離范圍 1000-5000 適用于脫鹽、肽與其它小分子的分離 SephadexG-50 Medium 葡聚糖凝膠 G-50 中 分離范圍 1500-30000 Sephadex G-50 Medium 葡聚糖凝膠 G-50 中 分離范圍 1500-30000 Sephadex G-75 葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 Sephadex G-75 葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 DEAE Sepharose FF DEAE瓊脂糖凝膠 FF 分離范圍：3000-80,000 Sephadex G-100 葡聚糖凝膠 G-100 分離范圍 4000-150000 Sephadex G-100 葡聚糖凝膠 G-100 分離范圍 4000-150000 Sephadex G-150 葡聚糖凝膠 G-150 分離范圍 5000-300000 DEAE Sepharose CI-6B 瓊脂糖凝膠CI-6B 分離范圍：5000-300,000 Sephadex G-150 葡聚糖凝膠 G-150 分離范圍 5000-300000 Sephadex G-200 葡聚糖凝膠 G-200 分離范圍 5000-600000 Sephadex G-200 葡聚糖凝膠 G-200 分離范圍 5000-600000 Sephadex G-200 葡聚糖凝膠 G-200 分離范圍 5000-600000 DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝膠 A-25 顆粒大�。�40-120μm 分離大�。盒〉鞍准熬薮蠓肿� DEAE Sephadex A-25 DEAE葡聚糖凝膠 A-25 顆粒大小：40-120μm 分離大�。盒〉鞍准熬薮蠓肿� DEAE Sephades A-50 DEAE DEAE葡聚糖凝膠 A-50 顆粒大�。�40-120μm，分離范圍：小蛋白及巨大分子 做純化的人可能經(jīng)常接觸到sephadex，BIO-Gel，sephacryl s-,sepharose BIo-Gel等幾種填料，有時(shí)會(huì)混淆在一起，看到一個(gè)貼子較好的介紹了這些填料的區(qū)別，希望對(duì)大家有用。sephadex(葡聚糖凝膠）：是由葡聚糖苷和3-氯-1，2環(huán)氧丙烷以醚鍵相互鉸鏈而成，不同型號(hào)的葡聚糖凝膠用英文字母G表示，如G-25，G-75等，G后面的數(shù)字為凝膠吸水量再乘以10。sephacryl：為葡聚糖偶聯(lián)丙烯基，再和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的介質(zhì)。它有較高的硬度，能承受比普通凝膠更大的靜水壓力，由于屬于部分大網(wǎng)孔型凝膠，可用于分離蛋白質(zhì)、核酸、多糖和蛋白聚糖甚至是病毒顆粒。sepharose瓊脂糖：瑞典稱sepharose；美國(guó)稱Bio-gel A；英國(guó)稱Segavac；丹麥稱Gelarose。Sepharose主要有三種型號(hào)：2B，4B，6B，阿拉伯?dāng)?shù)字表示凝膠中干膠的百分含量。 Bio-GA有6個(gè)型號(hào)：0.5M,1.5M,5M,15M,50M,150M。阿拉伯?dāng)?shù)字乘以1000000表示排阻限度。Sagavac分為：2F,4F,6F,8F,10F2℃4C6℃8C10℃阿拉伯?dāng)?shù)字表示凝膠中干膠的百分含量，F(xiàn)表示粉末狀，C表示顆粒狀。Gelarose有5種類型：2%，4%，6%，8%，10%。百分?jǐn)?shù)表示干膠量。瓊脂糖凝膠屬于大孔膠，由于其工作范圍的下限幾乎相當(dāng)于葡聚糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠的上限，所以多用于分離400000以上的物質(zhì)，比如核酸和病毒。聚丙烯酰胺凝膠：由單體丙烯酰胺合成線性多聚物，商品名為Bio-Gel P，有十種類型：從Bio-Gel P-2到P-300，p后面的阿拉伯?dāng)?shù)字乘以1000即相當(dāng)于排阻限度。這種膠在極端ph下可被水解，水解后形成的羧基，具有離子交換的性質(zhì)。另外，sephadex G是葡聚糖凝膠交聯(lián)的，用于除鹽和純化，BIO-Gel P-是聚丙烯酰胺凝膠，它們的剛性都不是很好，尤其是得水值越大的，越是如此。而sephacryl s-,是經(jīng)過接枝再交聯(lián)的葡聚糖凝膠，剛性比sephadex G好很多，如果你純化的物質(zhì)分子量小些，那可以用sephadex G是，中等偏大的選擇sephacryl s-,特別大的就得選擇sepharose（瓊脂糖凝膠），例如幾十到上百KD的蛋白，或者是病毒，大分子的超螺旋DNA等，而BIo-Gel A也是瓊脂糖凝膠。它們只是不同的公司而已，性能差別不大。 |
2樓2014-04-30 17:36:45
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【答案】應(yīng)助回帖
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cy211(星海慧兒代發(fā)): 金幣+3, 很有幫助，多謝回帖交流。 2014-05-04 10:59:55
cy211(星海慧兒代發(fā)): 金幣+3, 很有幫助，多謝回帖交流。 2014-05-04 10:59:55
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葡聚糖G15與G25處理方法一樣，供參考。 1.實(shí)驗(yàn)?zāi)z的制備：商品凝膠是干燥的顆粒，使用時(shí)需經(jīng)溶脹處理，稱取4克葡聚糖凝膠G—25，加50毫升蒸餾水，攪拌均勻，在室溫溶脹6小時(shí)，或沸水浴溶脹 2小時(shí)，一般采用后一種方法。再用傾瀉法除去凝膠上層水及細(xì)小顆粒，用蒸餾水反復(fù)洗滌幾次，再以緩沖溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗滌2—3次，使pH和離子強(qiáng)度達(dá)到平衡，最后抽去溶液及凝膠顆粒內(nèi)部氣泡，凝膠可保存在緩沖液內(nèi)。 2.裝柱：將層析柱洗凈，垂直固定在鐵支架上，選擇有薄膜端作為層析柱下口，將下口接上乳膠管并用螺旋夾夾緊。層析柱中加入洗脫液，打開下口螺旋夾，讓溶液流出，排除殘留氣泡，最后保留約2厘米高度的洗脫液，擰緊螺旋夾。將凝膠輕輕攪動(dòng)均勻，用玻璃棒沿層析柱內(nèi)壁緩緩注入柱中，待凝膠沉積到柱床下已超過l厘米時(shí)，打開下口螺旋夾，繼續(xù)裝柱至柱床高度達(dá)到8厘米,關(guān)閉出口。裝柱過程中嚴(yán)禁產(chǎn)生氣泡，盡可能一次裝完，避免出現(xiàn)分層。再用洗脫液平衡l至2個(gè)柱床體積，凝膠面上始終保持有一定的洗脫液。平衡后，擰緊下端螺旋夾。 |
4樓2014-05-04 09:17:09
yuyelin
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7樓2014-05-04 11:11:17
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10樓2014-05-05 09:57:34
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13樓2014-05-05 10:23:51
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17樓2014-05-05 10:36:11
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9樓2014-05-04 17:48:22
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