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慢病毒感染懸浮細胞并篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞的相關問題，各位大神留步幫幫忙！ 已有1人參與
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最近要做慢病毒感染懸浮細胞的實驗，同時篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)的細胞，puromycin篩選 現(xiàn)在有幾個問題很困惑： 1. 我想開始用24孔來篩選，一開始種的細胞密度大概是多少？ 2. 感染了病毒48h之后，加入篩選藥物，一般培養(yǎng)多久細胞會出現(xiàn)死亡，這中間要更換含有藥物的培養(yǎng)液嗎？因為是懸浮的細胞，我如何把篩選出的活細胞轉(zhuǎn)移到96孔板種繼續(xù)培養(yǎng)？我查了相關資料，有的說梯度稀釋種到96孔中，每孔1-2個細胞，細胞量這么少，能長得起來嗎？ 3. 96孔板種培養(yǎng)的時候我還要繼續(xù)保持原來篩選的puromycin濃度嗎？一般96孔中的細胞要長多久才可以長出克隆？ 第一次做這個實驗，沒什么經(jīng)驗，問的比較多，各位路過的大神留步幫幫忙啊�。�！不甚感激！ |
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panda73
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