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huhong1009新蟲 (初入文壇)
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[求助]
條件性基因敲除動(dòng)物 基因打靶的相關(guān)系統(tǒng) 間的關(guān)系 已有2人參與
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問(wèn)題一：在制作一只條件性基因敲除（CKO）動(dòng)物的時(shí)候：Cre/Cox與Flp/FRT 是二選一 or 都用； 問(wèn)題二：“鋅指核酸酶技術(shù)、TALEN、 CRISPR-Cas9” 這三技術(shù)說(shuō)的是載體設(shè)計(jì)的哪部分啊，，與 “Cre/Cox與Flp/FRT” 是什么關(guān)系？是說(shuō)在CKO中這三者一定要選其一嗎？ 不知道我說(shuō)明白沒(méi)有，最近看文獻(xiàn)看糊涂了 |
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CasGene
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
huhong1009: 金幣+3, ★★★很有幫助 2014-05-12 10:15:04
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huhong1009: 金幣+3, ★★★很有幫助 2014-05-12 10:15:04
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可以看我寫的blog http://blog.sina.com.cn/s/blog_12d8810790101gz5w.html 只要把loxp加進(jìn)去就好。傳統(tǒng)就是加長(zhǎng)的同源臂來(lái)同源重組。不過(guò)是在ES細(xì)胞里做。這個(gè)同源重組的效率是很低的。 現(xiàn)在可以用以上你說(shuō)的三種酶切一刀，這樣重組效率更高些。這樣的話就可以直接在受精卵里面做了。 因?yàn)樾首銐蚋�。百分之幾。篩選一兩百個(gè)胚胎就可以了。 |
2樓2014-05-10 19:41:37
jurkat.1640
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3樓2014-05-11 12:14:06
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5樓2014-05-11 13:04:25
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