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huang.m.yang新蟲 (初入文壇)
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[交流]
WB過程中marker越跑越淡最后消失
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最近一直在做WB，用的是8%的膠和康為世紀高分子量藍色預染marker（CW2013）上樣量10ul，在濃縮膠和分離膠剛開始的時候都能看到marker的條帶，顏色，帶型也是一樣的，可是跑到后來上面的藍色條帶消失了，藍色全部集中在最后的一條帶上，顏色很重。其他泳道的蛋白則沒有有任何的情況，曝光出來的圖片也是很好的，條帶壓的很細，很漂亮，只有marker出現(xiàn)這種情況，最開始是懷疑marker出現(xiàn)質(zhì)量問題以及marker處理的問題，單獨跑了一塊8%膠發(fā)現(xiàn)沒有任何降解的情況，考馬斯亮藍染色 ![\"WB過程中marker越跑越淡最后消失\"](\"https://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2014/0511/w85h3145415_1399813915_598.jpg#opennewwindow\") 現(xiàn)在懷疑是上樣過程出現(xiàn)問題，因為上樣的時候有相間隔的泳道loading buffer 5x （DTT）因為上樣的原因會有飄進marker的情況？會不會是其中的DTT或其他成分將偶聯(lián)的染色劑分開了，造成了這樣的情況？ |
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