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我聽五月天木蟲 (正式寫手)
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[求助]
ELISA測細胞攝取率，看明白想不明白�。�！
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收集細胞鋪種于96孔板，鋪種密度1萬個／孔，繼續(xù)培養(yǎng)一天，加藥，次序為：5孔加入PBS(pH=7．4)為陰性對照， 5孔加入抗HIF-1 a單克隆抗體作為陽性對照，剩余孔分為兩組：一組每孔加3uL 抗HIF-1a- PTX Pluronic P123免疫膠束(anti-HIF-1a-NMs-PTX)，一組每孔加3 uLPTX Pluronic P123膠束(NMs-PTX)，每孔補足樣液至200uL，置培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng)1h，每孔以PBS洗滌3次，每孔加HRP標記羊抗小鼠IgG二抗(H+L) (1：4000稀釋)細胞培養(yǎng)箱中孵育，PBS洗滌3次，加定量TMB顯色劑顯色10min 2 mol／L硫酸終止顯色，以酶標儀于450nm處檢測所有樣孔的吸光度，按以下公式計算攝取 二抗肯定是結合HIF-1 a單克隆抗體才對啊，然后NMs-PTX是怎么確定攝取率的？沒接HIF-1 a單克隆抗體的膠束進入了細胞也不能結合二抗啊？ |
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