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[求助]
用gDNA構(gòu)建35S啟動子重組體可行嗎？要不要加5'UTR?
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去年嘗試克隆我的基因的全長CDS，可是一直找不到陽性克隆菌落。老板就說可能是因?yàn)檫@個(gè)蛋白是膜蛋白，對大腸桿菌有毒性。后來就沒做成35s過表達(dá)的克隆。 今年，老板又建議用gDNA連接35S來試試。可我搜不到用gDNA克隆的35S重組體相關(guān)的文獻(xiàn)做參考。 要不要在起始密碼子前加上UTR呢？老板的意思是要加上。導(dǎo)致我現(xiàn)在在懷疑去年做不出來是不是就因?yàn)闆]有加UTR，多疑的毛病又犯了。 有沒有人做過類似的克隆？多謝了！ |
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