xfxycy3090

5樓: Originally posted by xfxycy3090 at 2014-05-29 13:18:24
首先，電泳時間長一點，看PCR擴增是否是一條帶；
其次，注意電泳的loading buffer，maker的和PCR的不一樣，電泳速率也可能不同；
最后，實在找不出原因，做個TA克隆，測序，看是不是要的序列。...

再聯(lián)系你，謝謝啦嘿嘿

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人生貴在行動，遲疑不決時，不妨先邁出小小一步。

6樓2014-05-29 17:51:42

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dongge2013

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7樓: Originally posted by 清雅風(fēng) at 2014-05-30 22:50:58
最近總是敲不掉基因（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化），都是隨機插入了，將農(nóng)桿菌的質(zhì)粒提出來轉(zhuǎn)大腸桿菌，竟然大腸桿菌不長了～郁悶中～～試了好多次了

可能是農(nóng)桿菌質(zhì)粒表達(dá)產(chǎn)物對大腸桿菌有毒害作用，你為什么要提出來轉(zhuǎn)化大腸桿菌啊？

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8樓2014-05-31 10:01:18

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清雅風(fēng)

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8樓: Originally posted by dongge2013 at 2014-05-31 10:01:18
可能是農(nóng)桿菌質(zhì)粒表達(dá)產(chǎn)物對大腸桿菌有毒害作用，你為什么要提出來轉(zhuǎn)化大腸桿菌啊？...

因為之前用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)真菌敲真菌的基因，檢測的時候感覺總是沒有敲掉，都是隨機插入的。真菌的表型快七八糟的。就想看看農(nóng)桿菌里的基因怎么了，就提質(zhì)粒轉(zhuǎn)大腸桿菌，再拿去測序

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朝著自己的理想奔跑，就是幸福！

9樓2014-05-31 12:33:58

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載體構(gòu)建中酶連轉(zhuǎn)化總是沒有陽性菌，淚崩~

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天道酬勤

10樓2014-05-31 13:17:47

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