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植物激素ABA提取相關(guān)問題
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我想用Elisa方法測(cè)定植物根系中的ABA含量,具體怎么操作,我前面查到了一些方法,說的不是很明白。 我查到的方法 1g冷凍芽樣 ↓ 8ml 80%甲醇冰浴研磨,4℃浸提過夜 ↓ 離心(10000rpm,4℃ 15min)→→→→→→→→→→→殘?jiān)?br /> ↓ ↓ ↓ 甲醇懸浮,離心(10000rpm,4℃ 15min) ↓ 合并 ↓ 上清液←←←←←←←←←←←←←←←←←←←←← 上清液 ↓加PVPP0.3g(吸附色素) 離心(10000rpm,4℃ 15min) ↓ 上清液過C18柱 ↓ 甲醇液 ↓ N2吹干 因?yàn)槲易龅氖歉矫娴膽?yīng)該沒有葉綠素干擾,主要就是上清液合并后再次離心過完c-18固相萃取柱后,方法上寫了個(gè)甲醇液,然后氮?dú)獯蹈?這是什么意思,甲醇液是干什么的在這里怎么加是再次濕潤(rùn)柱子么?另外氮?dú)獯蹈桑看档氖鞘裁? 一般過完柱子有的方法上也是說轉(zhuǎn)移到離心管中氮?dú)獯蹈,咋吹?一直吹到(jīng)]有液體么?然后儲(chǔ)存在-20攝氏度保存。有液體不會(huì)凍住么,沒液體還怎么用Elisa測(cè)定?跪求大神指導(dǎo)一下啊。 |
小寵天地 |
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這里甲醇是沖洗C18小柱,讓上清液充分回收,才能保證過了小柱激素?fù)p失更少。把過了小柱得到的液體,拿去氮吹,是濃縮樣本,激素含量一般都濃縮,要不相應(yīng)值太低,到時(shí)檢測(cè)不到。常規(guī)的濃縮是用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,但是這個(gè)需要大體量的樣本與試劑 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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