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拉風(fēng)蝸牛王金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
細(xì)胞加藥后出現(xiàn)異常急求大神幫忙 已有6人參與
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如圖所示，圖1為正常細(xì)胞，之后幾個(gè)圖為加藥后的細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)加藥后出現(xiàn)大團(tuán)黑球，而且最后吸出培養(yǎng)基時(shí)發(fā)現(xiàn)加藥組里有大量白色渾濁！是我加藥后細(xì)胞死亡嗎？但是我的藥濃度已經(jīng)很低很低了，做MTT也沒(méi)有顯示細(xì)胞存活率下降的問(wèn)題。還是我的藥里有菌？但我的藥是用DMSO溶的，而且我加藥后的培養(yǎng)基放置一段時(shí)間后并沒(méi)有出現(xiàn)渾濁。小弟真的無(wú)計(jì)可施了，求指教！如果真的是我的藥里有菌的話，我該如何處理？總共就那么點(diǎn)藥我不好過(guò)濾哈，高溫高壓滅菌就更不行了！ 正常細(xì)胞.png 加藥后異常1.png 加藥后異常2.png |
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3樓2014-06-03 11:03:38
yipan 
銅蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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【答案】應(yīng)助回帖
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拉風(fēng)蝸牛王: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝 2014-06-03 13:34:04
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拉風(fēng)蝸牛王: 金幣+2, ★有幫助, 謝謝 2014-06-03 13:34:04
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支原體是一種大小僅為0.2~0.3 μm，無(wú)細(xì)胞壁，可透過(guò)一般過(guò)濾膜（0.22-0.45 μm）的原核生物，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%，因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中被支原體污染是一個(gè)世界性的難題。多篇文獻(xiàn)研究表明：當(dāng)細(xì)胞（特別是傳代細(xì)胞）被支原體污染后，細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變，而細(xì)胞的生長(zhǎng)率一般并未發(fā)生顯著的影響，因而細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺(jué)。 吉銳生物根據(jù)自身的經(jīng)驗(yàn)開(kāi)發(fā)了MycoplasmaOUT™，用于解決因支原體污染而導(dǎo)致細(xì)胞污染或狀態(tài)下降的問(wèn)題，同時(shí)其對(duì)于見(jiàn)的革蘭氏陰性和陽(yáng)性菌也有一定的清除作用。從而確保研究人員的研究結(jié)果真實(shí)、可信。 可以聯(lián)系我，希望能幫到你。 |
2樓2014-06-03 09:42:52
逍瀟
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 從圖上看加藥組的細(xì)胞應(yīng)該是污染了，你把藥配好后用配注射器小濾頭（帶0.22um濾膜）過(guò)濾一下，浪費(fèi)不了多少藥。要想知道你用的DMSO對(duì)細(xì)胞有沒(méi)有影響，對(duì)照組也加相應(yīng)體積的DMSO。 |
4樓2014-06-03 13:29:09
拉風(fēng)蝸牛王
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5樓2014-06-03 13:33:30
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