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愛(ài)軌跡alick銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助大神有關(guān)pc12培養(yǎng) 已有1人參與
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| 求助各位大神，我剛買(mǎi)了一株未分化的pc12細(xì)胞株，準(zhǔn)備做神經(jīng)保護(hù)方面的，是否要用NGF誘導(dǎo)分化后再做？而且買(mǎi)回的未分化細(xì)胞太少了，是不是等長(zhǎng)的差不多再加NGF?由于本人剛接觸細(xì)胞培養(yǎng)很多問(wèn)題不是很清楚也不是很確定。謝謝！ |
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2011239043
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9樓2014-07-20 18:58:27
yipan 
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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體外誘導(dǎo)pc12細(xì)胞向交感神經(jīng)元樣細(xì)胞分化 取傳五代以上pc12細(xì)胞，經(jīng)消化分散后，制成5x十的五次方每毫升密度的細(xì)胞懸液，接種于涂有小牛皮膠的35mm塑料培養(yǎng)皿中，沒(méi)皿2ml，置于36度，10%co2的培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)液由90%DMEM，5%馬血清、NGF20ng每毫升和谷氨酰胺0.10g/L組成。每周換液兩次，每次更換一半新鮮培養(yǎng)液。 |
2樓2014-06-06 13:10:49
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謝謝！也就是先要培養(yǎng)傳代 差不多傳了四五代的時(shí)候再加NGF誘導(dǎo)分化對(duì)嗎？ 3樓2014-06-06 14:38:28
yipan
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4樓2014-06-06 16:32:46
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