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酵母cDNA文庫篩選與目的蛋白相互作用蛋白的幾個問題 已有1人參與
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試驗材料水稻 1、目的蛋白在N脅迫下表達增加,正常條件下也表達,因此在選取樣品的時候,是選擇normal or N stress condition ? 選擇的條件對于篩選出蛋白后,我再挑選與N相關(guān)的功能蛋白繼續(xù)做功能研究,會不會有影響? 2、篩選過程主要包括誘餌載體構(gòu)建、cDNA初級文庫、酵母感受態(tài)制備及轉(zhuǎn)化,還包括一些文庫檢測、自激活檢測、 毒性檢測等,有經(jīng)驗的人能否指導(dǎo)如何穿插安排能夠節(jié)省時間,提高效率? 3、目的蛋白的基因還有2個高度同源的基因,這3個應(yīng)該會同時做,有懂的人指導(dǎo)不? 至于后續(xù)測序結(jié)果分析和接下來的事情,再作打算 非常感謝 |
木蟲 (著名寫手)
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