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henghengyouyou銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
酵母雙雜交的滴度和計數(shù)問題。
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各位，交流一下。 最近看帖說雜交庫的滴度問題。達(dá)到要求固然好。但是有時可能略低于manual的要求。 1. 有的說滴度和細(xì)胞計數(shù)板相差可能100倍，滴度要低很多。這是能說明有些酵母細(xì)胞在做庫或者保存時候死掉了么？還是別的什么原因？ 2.如果是滴度低于manual要求10倍，可能是做庫的時候沒有condense到要求（或者死掉部分），能否在mating的時候，多加入些庫呢？比如原來需要1毫升，這次把20甚至30個庫condense一下，在進(jìn)行mating是否可行？ 3.關(guān)于陰性和陽性對照的mating問題，有個朋友說共轉(zhuǎn)化可以完成，就不需要在mating了，雖然效率低，但還是可以的。當(dāng)然，mating可以保證成功率。 4.滴度達(dá)不到要求固然影響結(jié)果，是否必須要重新做庫呢？ 謝謝各位交流！ |
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Neo2000
木蟲 (著名寫手)
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2樓2014-06-14 07:40:21
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