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574759350鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
菌種構(gòu)建過(guò)程酶切位點(diǎn)發(fā)生改變
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| 大家好，本人購(gòu)買了一雙基因載體pET-Duet-1，插入兩個(gè)基因構(gòu)建了一工程菌，但是測(cè)序后發(fā)現(xiàn)有一個(gè)基因出現(xiàn)了堿基缺失，所以重新進(jìn)行構(gòu)建，但是第二次構(gòu)建的時(shí)候出現(xiàn)了問(wèn)題，在酶切準(zhǔn)備插入第二個(gè)基因的時(shí)候發(fā)現(xiàn)有個(gè)酶切位點(diǎn)就是切不開，一開始以為酶失效了，但是經(jīng)驗(yàn)證酶沒有問(wèn)題，那這樣的話就是這個(gè)酶切位點(diǎn)自己突變了么？如果是這樣問(wèn)題可能出現(xiàn)在哪步，要怎么進(jìn)行解決？ |
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