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fanbobecky新蟲 (初入文壇)
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[求助]
5‘race
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| 最近在做race,用的是invitrogen的L1502-01,現(xiàn)在在p5’end,試了很多次都沒有出來,有一次巢式pcr的結(jié)果出現(xiàn)很多條帶,后來重新優(yōu)化了PCR條件,但是沒有出現(xiàn)條帶,只有smear。很是郁悶,不知道是哪里出了問題。。。我想問,試劑盒里提供的5‘Nested primer的退火溫度(78度)與我自己設(shè)計(jì)的巢式PCR的引物的退火溫度(68度)相差比較大會(huì)不會(huì)對(duì)pcr結(jié)果有很大影響? |
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