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baiqiao126銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
HEPG2細(xì)胞傳代后48小時(shí)培養(yǎng)基就變渾濁 已有2人參與
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前些天復(fù)蘇了HEPG2細(xì)胞，細(xì)胞生長緩慢，以前是1：6傳代3天就鋪滿，現(xiàn)在1:4傳代也要5天鋪滿，傳到第三代時(shí)做了MTT實(shí)驗(yàn)摸種板密度，發(fā)現(xiàn)吸光度特別大。 重新復(fù)蘇了 細(xì)胞，貼壁不錯(cuò)，但是傳了一代后，48小時(shí)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液渾濁。當(dāng)時(shí)懷疑是做MTT的時(shí)候槍頭污染了。把槍頭重新高壓滅菌了，PBS,培養(yǎng)基，胰酶全部換了新的，在培養(yǎng)箱里單獨(dú)孵了PBS，培養(yǎng)基，也是清澈的。 又重新復(fù)蘇了細(xì)胞，跟上次一樣，還是當(dāng)時(shí)貼壁不錯(cuò)，傳了一代后，48小時(shí)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上面有一層霧狀薄膜，但是當(dāng)時(shí)顯微鏡下細(xì)胞貼壁不錯(cuò)，我就換了一次液，換液后第二天就發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基仍然有霧狀薄膜，但是這回細(xì)胞死亡了，未漂浮，但是已經(jīng)看不見細(xì)胞本身了，顯微鏡下觀察底層是大片黑色圓點(diǎn)。 求助各位，可能的原因。不勝感激！ |
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1281678813
鐵蟲 (初入文壇)
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4樓2014-07-10 11:13:35
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2樓2014-06-18 09:21:32
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