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zhaoddan新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)菌致腐能力比較——生物膜測(cè)定方法中出現(xiàn)的問題求助
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我有10株不同細(xì)菌，要通過生物膜形成能力比較其致腐能力。我知道方法是：將10株細(xì)菌過夜培養(yǎng)，1:1000稀釋液加入96孔板培養(yǎng)24h，用結(jié)晶紫染色，用乙醇脫色，脫色液在570nm下用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值。我想問的是： 1.我需要測(cè)定這10株菌的生長曲線嗎？因?yàn)槲沂菍⑺芯黄疬^夜培養(yǎng)，可是不同菌的對(duì)數(shù)期不同�？墒沁@樣很麻煩。 2.有的文獻(xiàn)是控制初始濃度比如10^8 cfu/ml，我如何測(cè)定細(xì)菌的初始濃度啊，就是說如何將OD值與細(xì)菌的濃度成立線性關(guān)系？ 3.在移去培養(yǎng)液這步時(shí)，要把96孔板底部的膜移去嗎，另外有的菌頂部也是有一層膜的，是不是也要去除，只留吸附在壁上的細(xì)細(xì)的一條膜？因?yàn)槿绻稽c(diǎn)膜沒有吸掉的話OD值就會(huì)差很多的，大家的平行性好嗎 4.用酶標(biāo)儀測(cè)生物膜濃度需要控制OD值在0.2-0.8之間嗎？因?yàn)橛械募?xì)菌OD值很高的，如果1:10稀釋的話很多都超過1甚至2, 1:1000稀釋也有超過1的。我用的酶標(biāo)儀型號(hào)是：SpectraMax M2 我是微生物菜鳥，請(qǐng)大家指教�。�！謝謝~！ |
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