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鄭在愛你銀蟲 (小有名氣)
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CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)
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最近在做CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)，過程是：1，腫瘤細(xì)胞用1640養(yǎng)好后，用1640制成細(xì)胞懸液，鋪板。 2, 4小時(shí)后棄去板內(nèi)上清，把用無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)成熟的CIK細(xì)胞按不同比例制成細(xì)胞懸液，加到96孔板中。同時(shí)設(shè)好不同細(xì)胞數(shù)的單獨(dú)CIK細(xì)胞孔。培養(yǎng)48小時(shí)。 3，加MTT液，培養(yǎng)4小時(shí)。翻板棄上清，加DMSO，震蕩，490nm測(cè)OD值。 而我的疑問是：1，鋪腫瘤細(xì)胞，我用的是腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基，4小時(shí)后加CIK細(xì)胞時(shí)，我是應(yīng)該用CIK細(xì)胞的培養(yǎng)基還是腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基呢？如果用CIK細(xì)胞的培養(yǎng)基，需要把孔內(nèi)腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基棄掉嗎？ 2，可以腫瘤細(xì)胞，CIK細(xì)胞一起鋪板嗎？如果可以，應(yīng)該使用哪種培養(yǎng)基呢？3，加MTT液時(shí)，孔內(nèi)有約200微升的培養(yǎng)基，直接加MTT液就可以嗎？MTT液已配成5mg/mL，加MTT液不用考慮工作濃度嗎？4，可以適當(dāng)減少M(fèi)TT作用時(shí)間嗎？4小時(shí)對(duì)我來說，實(shí)驗(yàn)不太方便。 希望大家多多幫忙回答，謝謝~~~~ |
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