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降膽固醇乳酸菌的篩選 已有1人參與
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正己烷萃取的樣品,需用氮?dú)獯蹈蓛x揮干,但實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有此儀器,能否用其它方法代替?我想確定的是能否用60度烘箱烘干或用核酸蛋白濃縮儀代替(實(shí)驗(yàn)新手,求指導(dǎo) ) 測(cè)定膽固醇含量的步驟:(這是在一篇文章中摘抄的) 取樣品1ml,加入 6 mL 95%乙醇,并加入 4 mL 50% KOH,漩渦混勻;加蓋,60度水浴,10 min 后水浴冷卻,加入 10mL 正己烷,漩渦振蕩充分混勻,加入 6 mL 蒸餾水,漩渦混勻,室溫放置 10 min,靜置分層,小心吸取 8 mL 正己烷層(上層)轉(zhuǎn)移到清潔試管中;于 60度下,小心通氮?dú)饬鲗⒄和檎舾桑尤?4 mL 鄰苯二甲醛 試劑,充分溶解膽固醇,放置 10 min,緩慢加入 2 mL 濃硫酸,立即漩渦振蕩混勻,自然冷卻,靜置 10 min,在 10-90 min 內(nèi)測(cè)定 OD550 問(wèn)題:1.50%的KOH 和95%的乙醇是什么作用? 2.正己烷的量可以減少嗎?有的文獻(xiàn)中4ml的樣品加入3ml的正己烷,如果正己烷的量少的話,萃取的量也會(huì)受到影響吧? |
新蟲 (初入文壇)

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