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陶盛昌木蟲 (正式寫手)
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[求助]
DEAE柱多糖上樣量過載的問題 已有2人參與
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各位蟲友，我用DEAE纖維素純化多糖，第一次上樣300mg，水洗脫的曲線如圖一， 其不同濃度的鹽洗脫曲線的吸光度都很小，最大都不過0.2。其中之一，0.3Mol/lNacl洗脫液吸光度如圖二。然后第二次上樣就加大了上樣量，上樣量 為1g，其水洗脫曲線如圖三，感覺很不正常，是不是上樣量過載了？ 在此，請教蟲友三個問題： 1. 為什么各種不同濃度鹽洗脫時，測得吸光度都那么小，是沒有什么酸性多糖嗎？但我水洗脫的多糖也才18.9%。 2.上樣1g，水洗脫的曲線很不正常，各位能幫我分析下嗎，是不是上樣量過載？ 3. 實驗接下來該如何處理和進(jìn)行，請各位給些建議，謝謝。 有價值的建議將大量追加金幣！ 1.jpg 2.jpg 3.jpg |
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5樓2014-07-03 11:34:19
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10樓2014-07-18 00:26:08
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【答案】應(yīng)助回帖
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師兄，根據(jù)你圖一和圖二結(jié)合的來看，你的多糖應(yīng)該是沒掛在DEAE柱子上，請問你是用流穿模式做的嗎？ 根據(jù)你圖三的顯示，你洗脫鹽濃度不夠高，不能一次性洗脫樣品，建議你增加鹽濃度。 不知道你具體的實驗方案怎么設(shè)置，我的建議是，確定你目標(biāo)產(chǎn)物的收率，純度，活性的指標(biāo)。然后測試DBC,拉梯度測試最佳洗脫鹽濃度，優(yōu)化洗脫方式，測試樣品指標(biāo)，繼續(xù)優(yōu)化。不知道對你的實驗有幫助沒有。 |
2樓2014-07-03 09:37:27
wolfman840
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6樓2014-07-14 16:00:36
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