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[求助]
今天做了個雙熒光，出現(xiàn)了比較詭異的結(jié)果。。。 已有1人參與
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做的miRNA干擾試驗，與靶基因的3’UTR共轉(zhuǎn)的BHK細胞，今天做了一下雙熒光檢測，用的是PMIR-GLO載體。 結(jié)果問題來了，加過STOP以后，熒光值陡然升高，按照師兄師姐的說法，貌似應(yīng)該降低才對。。。。 1，有沒有戰(zhàn)友也遇到類似的情況？ 2，對于雙熒光素酶報告結(jié)果，應(yīng)該如何處理分析？（自己做，無人指導(dǎo)。。。） 先謝謝各位戰(zhàn)友了�。�！ PS:附上我的數(shù)據(jù)結(jié)果 123123.png |
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2014-07-04 14:28:41, 18.5 K
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已經(jīng)有4人回復(fù)
5樓2014-12-12 16:52:33
| 頂一下。。。。。。。。。。。。。。 |
2樓2014-07-06 18:17:11
3樓2014-07-06 18:20:49
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
utyutyy(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-12-12 20:21:50
utyutyy(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2014-12-12 20:21:50
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你的這個報告基因質(zhì)粒里面整合了兩個熒光素酶，螢火蟲和海腎，其中海腎作為內(nèi)參是嗎？看你的結(jié)果和我的非常像，我用的是psiCHECK-2 也是兩種質(zhì)粒整合在一個質(zhì)粒中的。我的海腎熒光素酶（內(nèi)參）的讀數(shù)也是明顯高于firefly的，兩者的比值在0.1左右。 還有，我轉(zhuǎn)染psiCHECK-2和pcDNA的熒光比值要高于轉(zhuǎn)染psiCHECK-2/靶基因和miRNA-expression的實驗組。 樓主找到解決的方法了嗎？ |
4樓2014-12-08 22:25:49
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