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如果我要檢測(cè)一個(gè)轉(zhuǎn)錄因子由于刺激而誘導(dǎo)性表達(dá)，刺激多長(zhǎng)時(shí)間可以用western檢測(cè)出來(lái)
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
lmc2537: 金幣+2 2014-07-07 16:23:27
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-07 19:02:18
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
lmc2537: 金幣+2 2014-07-07 16:23:27
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-07 19:02:18
| 一般情況下，建議樓主是做一個(gè)時(shí)間梯度的，常見(jiàn)的也是最保險(xiǎn)的：0，2,4,6,12,24h, 或者 0,4,8,16,24h 各種轉(zhuǎn)錄因子的活化時(shí)間也不是十分固定，看是哪個(gè)通路的，不過(guò)一般而已，2h左右就可以檢測(cè)到，既然是刺激入核，在之后的一段時(shí)間直到24h左右應(yīng)該都可以檢測(cè)到，有些情況24h之后會(huì)回復(fù)到正常水平。 |
2樓2014-07-07 16:16:57
3樓2014-07-07 16:23:19
4樓2014-07-07 16:27:46
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-07 19:02:35
lmc2537: 金幣+3, 明白，謝謝！ 2014-07-08 11:33:23
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-07 19:02:35
lmc2537: 金幣+3, 明白，謝謝！ 2014-07-08 11:33:23
| 如果你是為了做一種單純性的特殊刺激，去檢測(cè)一種轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)表達(dá)的情況，例如用LPS去刺激細(xì)胞，檢測(cè)IRF3的表達(dá)情況，由于LPS的特殊性以及劑量依賴性，低劑量24h也能看到變化，高劑量16h左右就恢復(fù)了。但是不管是什么刺激，我個(gè)人建議，最好的效果還是做時(shí)間點(diǎn)，0,2,4,6,12,24h 去檢測(cè)。 |
5樓2014-07-07 16:31:12
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