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[求助]
請(qǐng)教用過(guò)XmnⅠ的童鞋們
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最近在用XmnⅠ（平末端）嘗試改造pKD46，將其抗性改為慶大霉素的�？墒嵌寂撕镁昧�，都沒(méi)有成功，快要崩潰放棄掉了。請(qǐng)問(wèn)大牛們 1、設(shè)計(jì)XmnⅠ的酶切位點(diǎn)的時(shí)候要注意什么呢？ 2、還有是酶切PCR產(chǎn)物好，還是連到T載體上再酶切比較好呢？ 3、酶切之后是不是必須要去磷酸化，如果用新鮮的直接連接可不可以呢？ 傷感傷感啊。。。真是丟丟。。。 |
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