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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 生物化學 » 大片段連接
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[求助]
大片段連接
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我的外源片段是8000bp（CLA1，PAC1雙切）想與腺病毒骨架（切后為28000bp)連接，小弟目前已經(jīng)連接一年之久，但就是連接不上，每次轉化長的斑很少，最多時也不超過30個。麻煩大神們幫幫，謝謝了。 目前我想到的方法有：1、換了商用化的DH5感受態(tài) 2、換了不同的腺病毒載體 3、換了不同的連接酶 4、摸過不同的連接比例 我認為可能有點問題：1、我的酶切產(chǎn)物都是一直放在四度 ，有可能有部分降解。 |
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