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聚丙烯酰胺凝膠電泳的幾個(gè)問(wèn)題，急求�。�！ 已有5人參與
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本來(lái)剛剛接觸分子生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，最近老板安排跑微衛(wèi)星引物的通用性，從相關(guān)文獻(xiàn)上獲得了凝膠的配方及電泳步驟，但是做起實(shí)驗(yàn)來(lái)卻遇到了像許多困難，急求大神幫忙！ 1.凝膠后往加樣孔加樣經(jīng)常出現(xiàn)擴(kuò)散現(xiàn)象,本人嘗試過(guò)3次不同的pcr產(chǎn)物結(jié)果都是如此，凝膠時(shí)間為70分鐘，問(wèn)題是不是出在緩沖液上? 2.起膠的時(shí)候出現(xiàn)斷裂現(xiàn)象，膠很脆。 以上兩種現(xiàn)象會(huì)不會(huì)與配置TBE時(shí)的EDTA質(zhì)量有關(guān)，EDTA溶液是去年配制的，經(jīng)詢問(wèn)說(shuō)是可以使用。 |
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 核酸生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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Titanic416
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
蠟筆曉寒(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2014-07-27 09:27:05
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這個(gè)還沒(méi)有遇到過(guò)呢，ssr時(shí)，出現(xiàn)膠脫落的現(xiàn)象，后來(lái)發(fā)現(xiàn)是染色的時(shí)候，在氫氧化鈉中泡久了，后來(lái)就沒(méi)出現(xiàn)過(guò)，你預(yù)電泳了沒(méi)有，點(diǎn)樣太慢了嗎，緩沖液換下試試。七十分鐘應(yīng)該夠了的。膠斷了，肯定是配的有問(wèn)題。這個(gè)你在好好查查，摸清條件是關(guān)鍵呀。修復(fù) [ 發(fā)自小木蟲(chóng)客戶端 ] |
2樓2014-07-27 00:12:43
3樓2014-07-27 08:52:07
幺哥擼啊擼
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9樓2014-07-29 11:00:24
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