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fengsong53銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
構(gòu)建植物表達(dá)載體，GUS或GFP對(duì)目的基因的功能是否有影響？
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大家好，最近我要構(gòu)建植物過(guò)表達(dá)載體然后轉(zhuǎn)化到擬南芥中進(jìn)行基因功能驗(yàn)證，但是現(xiàn)在遇到了一個(gè)疑惑。在構(gòu)建植物表達(dá)載體的時(shí)候，如果將目的基因連上GUS或GFP構(gòu)建植物表達(dá)載體，是否會(huì)對(duì)目的基因的功能產(chǎn)生影響？我查了查資料， （1）有的說(shuō)可以。 （2）有的說(shuō)將GUS或GFP連到目的基因N端和C端對(duì)目的基因的功能影響不同。但我想問(wèn)，在轉(zhuǎn)基因之前，具體怎樣做才能判斷出來(lái)？ （3）有人說(shuō)可以在目的基因后面加上終止密碼子，使后面的GUS或GFP基因不表達(dá)。但我有一個(gè)疑惑，終止密碼子和終止子的距離增加了是否會(huì)對(duì)目的基因的翻譯及時(shí)終止產(chǎn)生影響？ 請(qǐng)各位高手幫忙解答一下，不勝感激！ |
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