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關(guān)于培養(yǎng)基中白色不溶性沉淀物 已有3人參與
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我有2個項目在做大腸的表達(dá)，A項目還行，但是另一個B項目遇上問題了，我做了3次，每次B項目的培養(yǎng)基滅菌后有白色不溶性沉淀，在5L罐里像雪花一樣飛，時多時少，直接影響我的產(chǎn)物表達(dá)。A項目和B項目的培養(yǎng)基配方有一些差別，蛋白胨和酵母粉的量A項目總量較少（比例1.6:1），B項目總量較多（比例1:1），A項目的培養(yǎng)基中沒有硫酸銨，B項目中加了1g/L的硫酸銨。其余營養(yǎng)物質(zhì)就是磷酸鹽和硫酸鎂（硫酸鎂都是1g/L的濃度）�，F(xiàn)在就是A項目的培養(yǎng)基做了近十次，一次也沒有不溶性沉淀，B項目每次都有。究竟是什么原因？我把培養(yǎng)基放在小瓶里，發(fā)現(xiàn)硫酸銨過量，4g/L反而澄清，還有我換成氯化銨也是澄清，換成無水硫酸鈉就有沉淀。硫酸鹽在作怪？有沒有有經(jīng)驗的朋友給點提示，最好有解決辦法，解決不溶性沉淀的問題。 1、消泡劑；2、硫酸根；3、磷酸氫二鉀吸潮引入碳酸氫鹽；4、銨離子把蛋白質(zhì)沉淀了；5初始pH的問題 |
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