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水中月佳月影銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：用間苯二酚法測(cè)植物蔗糖含量，為什么做標(biāo)曲時(shí)不顯色呢？ 已有2人參與
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求助：用間苯二酚法（參考張志良的實(shí)驗(yàn)書方法）測(cè)植物蔗糖含量，為什么做標(biāo)曲時(shí)不顯色呢？ 以下是我用的步驟，求大俠指導(dǎo)啊。。。 蔗糖提取與測(cè)定（采用間苯二酚法） 原理：酮糖在一定條件下和間苯二酚形成鮮紅色，在480nm波長(zhǎng)下可比色測(cè)定。在一定條件下，本反應(yīng)為酮糖所特有，故可作為酮糖測(cè)定依據(jù)。將磨碎后的植物組織用80%乙醇抽提，該提取也可用來測(cè)定蔗糖。測(cè)定時(shí)先用堿與樣品共熱，破壞其中的還原糖，然后用間苯二酚測(cè)定蔗糖中的果糖部分。色素對(duì)本實(shí)驗(yàn)影響大。 實(shí)驗(yàn)藥品：2mol/LNaOH，30%HCI（10mol/L），蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液（取已在80℃烘箱中烘至恒重的分析純蔗糖100mg配成500ml溶液，即的200ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液），0.1%間苯二酚溶液（0.1g間苯二酚溶于100ml 95%乙醇，置棕色瓶?jī)?nèi)保存。） 步驟：吸取可溶性糖提取液0.4ml，加入200ul 2mol/L NaOH，100℃煮沸5min，冷卻后加入2.8ml 30%HCI，0.8ml 0.1%間苯二酚，搖勻，80℃水浴反應(yīng)10min，冷卻后在480nm處測(cè)定OD值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蔗糖含量。 取標(biāo)準(zhǔn)蔗糖溶液稀釋成一系列0~100ug/ml（0、20、40、60、80、100）的不同濃度的溶液，按上述方法測(cè)OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 我做標(biāo)曲時(shí)，從加入200ul 2mol/L NaOH開始和從加入2.8ml 30%HCI這兩種都試過，都顯色不了，到底該怎么做呢？是蔗糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度太低了嗎？還是什么原因呢？ |
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5樓2017-03-08 15:42:50
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3樓2014-09-23 17:38:46
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