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fckgood新蟲 (初入文壇)
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擴出的目的帶，自己跑電泳 很亮，測序時為什么總說 濃度低，取消。。 已有6人參與
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請教各位大俠： 我擴的基因片段，自己跑了電泳，目的條帶比maker亮，送測后，說 濃度低，取消測序，于是自己將之前預(yù)留的其中一管樣自己再跑電泳看，目的條帶還是比較亮；于是再擴，送7個樣，僅1個出來了，其他結(jié)果還是如前；第三次擴了后，說 信號弱，無信號，無條帶取消。。 請教大俠，這是哪里出了問題，濃度低、信號弱、無信號、無條帶取消。。分別說明不同的問題還是同一問題呀？請問該如何解決呀？ 不勝感激！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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fckgood(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵回帖交流 2014-08-10 10:29:46
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你是不是回收連接質(zhì)粒載體送去測序的��？ 如果是這樣子，那就有多個環(huán)節(jié)問題： 1 是不是回收出現(xiàn)了問題，你用的試劑盒回收的嗎？可以在洗脫的時候洗脫兩次，這樣可以增加回收效率 2 連接質(zhì)粒載體，不知道你用的是什么載體，不過我一般用T-easy，所以你要考慮連接載體上的環(huán)節(jié) 3 抽提質(zhì)粒，不知道你用的什么方法，是試劑盒還是sol I II III，抽了質(zhì)粒你可以先酶切自己驗證一下 4 我覺得一般情況下，送去測序的路途上應(yīng)該沒有什么問題 |
3樓2014-08-10 09:48:48
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