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hakkie新蟲 (初入文壇)
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[求助]
細(xì)胞凍存 已有3人參與
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| 結(jié)腸癌lovo細(xì)胞，25cm培養(yǎng)瓶，凍存時(shí)致密度為50%，凍存1ml*2管，一個(gè)月后復(fù)蘇細(xì)胞生長狀態(tài)極差。這個(gè)和凍存時(shí)密度小有多大關(guān)系？凍存前細(xì)胞生長狀態(tài)好；另外由于同時(shí)還凍存了其他幾管密度90%的同種細(xì)胞，復(fù)蘇后細(xì)胞狀態(tài)挺好，所以凍存液和凍存程序是沒問題的。這次復(fù)蘇因?yàn)榕囵B(yǎng)基換了牌子，所以不知道是培養(yǎng)基的問題，還是因?yàn)榧?xì)胞凍存時(shí)密度低，凍存效果不好的原因。 |
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2樓2014-08-21 10:20:08
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【答案】應(yīng)助回帖
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hakkie: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-12-07 22:08:47
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
hakkie: 金幣+5, ★★★很有幫助 2014-12-07 22:08:47
| 50%凍兩管，密度明顯太低，凍存液里的DMSO對細(xì)胞有毒性，再加上凍存時(shí)本來就會死亡一些細(xì)胞，凍存時(shí)密度太低，就會造成很難復(fù)蘇！最好是細(xì)胞培養(yǎng)到融合率達(dá)到70%以上時(shí)才去傳代或凍存。我們實(shí)驗(yàn)室的經(jīng)驗(yàn)是，當(dāng)細(xì)胞融合率為90%左右時(shí)凍存細(xì)胞，一個(gè)培養(yǎng)盤（直徑10cm）凍存三管！你可以參考一下！ |
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hakkie4樓2014-08-21 14:08:15
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