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新盈記1989銀蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
植物內(nèi)生放線(xiàn)菌RAPD跑膠沒(méi)結(jié)果，求高人指點(diǎn)迷津
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我第一次做放線(xiàn)菌RAPD，實(shí)驗(yàn)室之前也沒(méi)人做，所以實(shí)驗(yàn)室只有16s，沒(méi)人做RAPD，摸著石頭過(guò)河無(wú)人指導(dǎo)，有很多不解，希望大家指教，我做RAPD是因?yàn)镾CI文章要求有新方法，我的文章即將提交，就差RAPD一個(gè)結(jié)果，結(jié)果也就是一句話(huà)，抽象說(shuō)明三株菌的RAPD結(jié)果有什么差別，看看兩株16s相似度高達(dá)99.98%的菌株及其最近相似度的菌株p出的條帶有什么不同，不用之后的建樹(shù)步驟，只求做出一張圖來(lái)向老師交差，另外大論文用，不求精準(zhǔn)，我用三種引物，同種體系及條件，跑膠無(wú)結(jié)果，想問(wèn)下列問(wèn)題 1，RAPD使用的酶是哪種，與20或40體系16sPCR一樣么 2，RAPD引物放置有什么要求 3，鎂離子是單獨(dú)加的么，有什么量的要求，比例什么的 4，大家有做放線(xiàn)菌RAPD的幫忙找找合適的體系與條件，另外是每種引物對(duì)應(yīng)一種體系與條件么，還是都是自己摸索的 5，跑膠時(shí)電壓為多少 6，我做RAPD，加試劑步驟，跑膠什么的大多按16S步驟來(lái)，希望大家找點(diǎn)一下兩者的區(qū)別 謝謝大家 |
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