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漂流瓶1991新蟲 (小有名氣)
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[求助]
雙酶切求助 已有3人參與
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目的條帶大小應(yīng)為3447bp，使用kpn1和sal1兩種限制性內(nèi)切酶，菌液PCR如圖1，選取1、2、3、5繼續(xù)試驗(yàn)，擴(kuò)大培養(yǎng)后雙酶切電泳檢測(cè)如圖2，酶切時(shí)間3小時(shí)后又在4度冰箱里放置了一個(gè)多小時(shí)；圖3也是雙酶切圖，酶切時(shí)間兩個(gè)半小時(shí)，感覺有些符合要求，但是由于使用的膠板上排梳子之前用過，有些重疊，所以用剩余樣品重新跑了膠，此時(shí)樣品酶切了兩個(gè)半小時(shí)后在4度冰箱里放了一個(gè)小時(shí)左右，再次電泳檢測(cè)結(jié)果和如圖2一樣。（所以載體為Pmd19，大小2692bp）求高手解釋一下原因，為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的結(jié)果？？非常感謝！ 圖1 圖2 圖3 |
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