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LisaT_PUMC新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
新手養(yǎng)Hela細(xì)胞，總是有成團(tuán)的現(xiàn)象，感覺(jué)是重懸出了問(wèn)題，求助技巧�。。� 已有3人參與
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如題… 細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)后，鏡下總能看到幾個(gè)細(xì)胞聚成一團(tuán)生長(zhǎng)，密度達(dá)到80-90%時(shí)位于團(tuán)塊中心的細(xì)胞狀態(tài)就很不好了。個(gè)人感覺(jué)是細(xì)胞重懸出了問(wèn)題，但每次吹打、混合時(shí)都操作了20次左右，肉眼也看不到團(tuán)塊，不知道該怎么改進(jìn)操作啊>_<………… 養(yǎng)了快兩個(gè)月了一直是這種狀態(tài)，細(xì)胞分不勻影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)，急啊……求大蝦們給些技術(shù)上的建議，多謝了�。。。。�！ |
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8樓2014-09-01 10:40:42
sxxuan
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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應(yīng)該是消化時(shí)間沒(méi)有掌握好，把細(xì)胞消化至縮回來(lái)變圓，但有沒(méi)有從壁上脫落下來(lái)，這種狀態(tài)就一吹全部都是散的細(xì)胞。 不同狀態(tài)的細(xì)胞消化時(shí)間不太一樣，可以適當(dāng)稀釋胰酶，直接在室溫消化，一直觀察，也可以在37度放2min就拿出來(lái)，自己摸索好時(shí)間。 消化過(guò)了細(xì)胞成團(tuán)脫落，如果一直掌握不好的話，就不如犧牲一些細(xì)胞，只保留部分比較散的細(xì)胞，hela只要養(yǎng)起來(lái)就基本是瘋長(zhǎng)的。 前面也有蟲(chóng)子提到過(guò)，吹了之后要到顯微鏡下看看才行啊 |
4樓2014-09-01 09:21:52
璧月
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3樓2014-09-01 07:47:03
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6樓2014-09-01 09:26:01
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7樓2014-09-01 09:28:16
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9樓2014-09-01 12:37:38
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